产品货号：
KL221004
中文名称：
单链DNA环化试剂盒
英文名称：
ssDNA Circularization Kit
产品规格：
50T
发货周期：
1～3天
产品价格：
询价
本试剂盒适用于长度在20nt以上的单链DNA环化，所得单链环状DNA可以用于RCA扩增。
保存：-20℃，有效期1年。
本试剂盒足够50次10μL体系的ssDNA环化反应。
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- 即开即用，十分简单方便，用户不需要辛苦摸索条件。
- ssDNA的5'必须有磷酸基团，3'必须是羟基基团。
- 环化效率最高可以达到90%以上（ssDNA越长，效率越低）。
- 本制品对ssRNA也有环化能力，故模板中不得有RNA污染。
| 组分 | 规格 |
| 10×单链DNA环化反应液A | 50μL |
| 20×单链DNA环化反应液B | 25μL |
| 25×单链DNA环化酶 | 20μL |
| 超纯水 | 1mL |
保存：-20℃，有效期1年。
本试剂盒足够50次10μL体系的ssDNA环化反应。
- 准备单链DNA模板：可以用自选的方法制备单链DNA模板，最简单的方式是直接人工合成单链DNA，但必须将5'端修饰为磷酸基团（合成DNA 5'端的默认基团是-OH）。如果单链DNA来源于其他反应体系，则最好电泳回收（如尿素-PAGE电泳）以便去除其他成分对环化反应的干扰。为了方便后续克隆，可以在待突变片段两端设计成专一的、不存在于其他位置的限制性内切酶位点。
- 设置单链DNA环化反应，在PCR管中按下表加入各成分：
成分 样品管 阴性对照 终浓度 5'端磷酸化的单链DNA 5μL 5μL 10pmol/μL 10×单链DNA环化预混反应液A 1μL 1μL 20×单链DNA环化预混反应液B 0.5μL 0.5μL 25×单链DNA环化酶 0.4μL 超纯水 3.1μL 3.5μL - 65℃保温1小时。需要加热盖，否则反应体系中的水会蒸发。
- 如果需要去除没有环化的单链DNA，可以直接加入10U的Exonuclease 37℃酶切15分钟。本试剂不含相关成分。也可以加入本公司的线状DNA清除剂（需要另购）。
- 90℃ 10分钟灭活反应体系。如果不能加热，可以加入自备的10mM EDTA。
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